El Museo diocesano prenestino di arte sacra fue abierto al público en mayo de 2005 y está ubicado en un cuerpo del episcopio, un edificio del siglo XVII. Originalmente sede del primer seminario diocesano, fundado en 1669 por el cardenal Antonio Barberini Jr, desde 1759 el palacio es residencia del obispo y alberga, además del Museo de Arte Sacro, el Archivio Histórico, la Biblioteca Diocesana y las oficinas de la curia.

Dos plantas al final de un largo trabajo de restauración y montaje se han encontrado orfebrería, esculturas, una sección arqueológica, una dedicada a epígrafes, la colección de vestiduras sagradas, pinturas, exvotos, muebles de madera y bronce, documentos del Archivo histórico, incluidas las bulas papales, cartas pastorales y pergaminos, y los libros antiguos más preciados de la Biblioteca diocesana.

Hay numerosas obras valiosas guardadas en el museo. Desde 2008 el cuadro atribuido a Michelangelo Merisi da Caravaggio Decapitazione di san Gennaro, propiedad del Fondo Edifici di Culto, Ministero degli Interni embellece la pinacoteca. La pintura fue identificada por el profesor Maurizio Marini en 1965 en el Convento de Sant’Antonio Abate de los Padres Carmelitas en Palestrina; transportado a la Galleria Nazionale di Arte Antica de Roma fue sometido a estudios y restauraciones, uno en 2007 bajo la dirección de Claudia Tempesta. La cuestión de la atribución está abierta, involucrando a los seguidores de Caravaggio, Battistello Caracciolo en particular.

En colaboración con los institutos culturales Archivio y Biblioteca y con los funcionarios diocesanos, en particular la oficina de Catequesis se mueve en el panorama de las iniciativas educativas en la zona, tratando de ser un signo de promoción cultural. El cuidado, puesta en valor y difusión del patrimonio diocesano, también a través de la web y las redes sociales, se encuentran entre los principales objetivos del Museo Diocesano, que en constante estudio de las obras expuestas y su relación con el territorio y una importante acción de restauración y conservación, gracias también a los fondos 8xmille para la Iglesia Católica

El Museo Diocesano forma parte del Sistema museale dei castelli romani e prenestini Museumgrandtour, la red de museos que actualmente incluye 25 realidades culturales entre museos y zonas arqueológicas.